【小怪獸被抓住了】山東省臍血庫實現(xiàn)極微量微生物快速檢測技術(shù)的重大進展
“十月懷胎,一朝分娩”,隨著嬰兒的一聲哭響和臍帶的離斷后,承擔著“生命保障”的臍帶血被醫(yī)生收集起來。這份“珍貴的生命資源”就運送到山東省臍血庫,在臍血庫中會經(jīng)過一系列的處理和檢測,其中一項是涉及到臍帶血內(nèi)是否存在細菌和真菌的檢測,如果檢測到細菌和真菌則不能應用于臨床,臍帶血就會被廢棄處理。
我們?nèi)魧⒄殠а扔鳛橐惶逗坞x在臍帶血中的細菌或是真菌就像是一個個的“小水怪”。目前想要檢測出來這些“小水怪”采用的是傳統(tǒng)的血液培養(yǎng)法。該方法是將樣本接種于培養(yǎng)瓶樣中,置于血培儀中進行培養(yǎng),樣本中如果存在微生物,則會代謝產(chǎn)生二氧化碳,就會被儀器捕捉到,則判定臍帶血中有微生物的存在。這是血液微生物檢測的金標準,但其檢測周期長,一般需要5-7天。那如果我們想要盡快使用臍帶血怎么辦呢,有沒有更快速的方法能達到這個目標呢?
這是一個世界難題,但近日山東省臍血庫在實現(xiàn)極微量微生物快速檢測技術(shù)中有了重大進展,對于未來臍帶血等血液制品的快速出庫和滿足臨床最佳治療時機具有非凡意義。
不斷技術(shù)創(chuàng)新,響應國家指導原則
一直以來,新鮮血液(等生物)制品進行微生物快速檢測和出庫服務都是快速臨床應用的技術(shù)瓶頸。我國《干細胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導原則(試行)》中提出:應根據(jù)新的干細胞基礎(chǔ)及實驗技術(shù)研究成果,針對各自干細胞制劑的特性、特定的臨床適應癥,研發(fā)新的快速檢驗方法,用于干細胞制備過程各階段的質(zhì)量控制和制劑的放行檢驗。山東省臍血庫開發(fā)臍帶血微生物快速檢測技術(shù)正是為了響應該指導原則,對今后新鮮的臍帶血或其他生物產(chǎn)品的快速使用有重要意義。
數(shù)字PCR技術(shù)
助力臍帶血中微生物的極微量快速檢測
日前,山東省臍血庫研發(fā)的利用數(shù)字聚合酶鏈式反應(Digital Polymerase Chain Reaction,PCR)技術(shù),于6小時左右在分子水平上對新鮮血液制品中微量的細菌和真菌進行快速檢測。
在血液這樣較為復雜的生物體系中,提取極微量的病原微生物核酸是極為困難的。臍帶血樣本屬于混合樣本,有大量人細胞的干擾,再一個是細菌和真菌細胞體外具有堅固的細胞壁(如細菌模式圖),微量情況更是難以裂解和提取到充足的基因。
在臍帶血樣本核酸提取過程中,山東省臍血庫研發(fā)團隊借鑒國外先進的技術(shù)路線,優(yōu)化技術(shù)參數(shù),將微生物核酸進行富集提純。使用靈敏度極高的數(shù)字PCR技術(shù)將提純得到的核酸進行微液滴制備和PCR反應,經(jīng)數(shù)字PCR儀檢測,可以檢測到血液中可能存在的微量微生物,檢測下限可達每毫升一個真菌細胞或每毫升10個細菌細胞的極限水平。
可以說,臍帶血中微生物快速檢測技術(shù)路線中主要難題已經(jīng)得到解決,山東省臍血庫將不斷完善優(yōu)化血液制品中微生物的提取和檢測,相信在不久的未來,不僅在臍帶血中可以實現(xiàn)極微量微生物的快速檢測,在其他生物制品中,也可以得到應用,極大滿足實際需求!
小怪獸,再也翻不起大浪頭來嘍!